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PCR 的問題，無疑是絕大多數(shù)學生物的人都關心的問題。今天我們把相關內容整理出來，與大家共同討論，希望對大家能有所幫助。
一、引物設計
所謂“工欲善其事，必先利其器”，這年頭手工設計引物的人似乎不多，還是用軟件方便些，防止你一不小心看走眼，丟一個堿基，同時計算起來也方便。設計軟件有很多，既可以在線設計，也可以用Primer5、Oligo6.65 等等。
1. 引物設計的原則
細心地進行引物設計是PCR 中最重要的一步。理想的引物對只同目的序列兩側的單一序列而非其他序列退火。設計糟糕的引物可能會同時擴增其他的非目的序列。下面的指導描述了一個可以增加特異性的引物所具有的令人滿意的特點：
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